Tijdens de Rotterdamse Museumnacht stelden de Rotterdamse musea en galeries hun deuren van 20.00 tot 02.00 uur open. Zo maakte je op een laagdrempelige manier kennis met de kunst en cultuur in Rotterdam. Tijdens de Museumnacht versterkten speciale activiteiten de hoge kwaliteit van het culturele aanbod in Rotterdam.
De Rotterdamse Museumnacht werkt met een passe-partout (een herkenbare button met knipperend lichtje): met één entreebewijs kon tijdens het evenement alle deelnemende musea en galeries worden bezocht. De Rotterdamse Museumnacht had elk jaar een ander thema. Naast de ruime keus van programmering bij de deelnemende instanties was ook de programmering in de buitenruimte een herkenbaar en vast onderdeel van de Museumnacht. Hiermee onderscheidde Museumnacht in Rotterdam zich van andere Museumnachten. Dat aanvullende programma zorgde ervoor dat de beleving van de Museumnacht compleet was: ook op straat was de Museumnacht alom aanwezig.
Het gebied van de Rotterdamse Museumnacht strekte zich uit over de gehele ‘culturele as’ in Rotterdam: vanaf het Centraal Station tot aan de Parklaan en vanaf het Museumpark tot aan Oostplein.
Tijdens de laatste editie in 2014 namen de volgende instellingen deel aan de Rotterdamse Museumnacht:
Aboriginal Art Gallery
ARMINIUS
Belasting & Douane Museum
Bibliotheek Rotterdam
BOOR
Chabot Museum
Cokkie Snoei
Fotogalerie Rotterdam/Fotoacademie
Galerie Atelier Herenplaats
Galerie Christian Ouwens
Galerie De Aanschouw
Galerie Frank Taal
Galerie RAM
Galerie VIVID
Garage Rotterdam
Goethe-Institut Rotterdam
Het Havenmuseum
Het Nieuwe Instituut
Het Plafond
House of Ababa
Joey Ramone
Kunstuitleen Rotterdam
LantarenVenster
Laurenskerk
Mariniersmuseum
Maritiem Museum Rotterdam
Montie de Avondkapper
Museum Rotterdam
Natuurhistorisch Museum
Nederlands Fotomuseum
Oogziekenhuis
P S Zituaction
RAAF
RoMeO
Roodkapje
Rotterdamse Schouwburg
SARATIMTRUST
Schaakstukken Museum
Showroom Mama
SKVR
ss Rotterdam
Stadion Feijenoord
Stadsarchief Rotterdam
Studio Zi
TENT
V2_
Van der Vlies en Koers
Villa Zebra
Wallgallery
Witte de With Center for Contemporary Art
Worm
Zic Zerp Galerie